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核酸检测PCR实验室建设要点:

核酸检测PCR实验室是分子生物学研究和实验的常规方法, 也是生物学、医学临床等领域广泛应用的实验技术;实验室通常分为四个区域,即:试剂准备区、样品制备区、核酸配制和扩增区、产物分析区(如使用全自动分析仪,区域可适当合并)。进入各个区域必须严格按照单一方向进行(单向走廊),不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色);工作人员离开时,不得将工作服带出。

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核酸检测PCR实验室建设要点:通常PCR实验室没有严格的净化要求,需根据实验内容确定实验室洁净度。当PCR实验样品需要保护时,实验室应设洁净空调系统。对于2019-nCoV核酸检测实验室,建议设置10万级净化。

气流组织宜采用上送下排,送风口和排风口布置应使室内气流停滞的空间降低到较小程度。在生物安全柜操作面或其他有气溶胶操作地点的上方附件不得设送风口过滤器排风口应设在室内被污染风险高的区域,单向布置,不得有障碍;不能以回(排)风夹墙代替排风直管,排风过滤装置与排风总管的连接必须全部是实体风管。

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PCR实验室为什么要进行三区隔离?

PCR反应过程中不断进行升温降温,液体蒸发又冷凝,PCR管中部分空气形成气溶胶,携带大量的DNA扩增产物(注意,1ng扩增产物中可作为模板的DNA片段数量,超过1ng起始模板中可扩增DNA片段数量的几百万倍甚至更高。比如人的基因组DNA有30亿个bp,要扩增的单拷贝基因片段是300bp,1ng起始模板中可以作为模板DNA片段只占总起始模板DNA总量的千万分之一)。如果在实验室打开含PCR扩增产物的管盖,大量携带DNA扩增产物的气溶胶就会涌出,扩散到空气中,从而对环境造成污染。

虽然在整个空间环境中DNA的含量很低,但由于理论上只要有1个可做为模板的DNA片段也能PCR扩增成功,这就是为什么在污染环境中阴性对照也能扩增出条带的原因。所以在PCR实验室(比如临床PCR检验实验室),通常有四区隔离(或至少是三区隔离)的要求。

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